​​Dronningen er yngste datter af John Dalgleish Donaldson, professor i anvendt matematik, født i Skotland den 5. september 1941, og Henrietta Clark Donaldson, født den 12. maj 1942. Parret blev gift i Edinburgh, Skotland, den 31. august 1963 og emigrerede til Australien i november samme år. I 1975 fik de australsk statsborgerskab. Dronningens mor arbejdede som direktionssekretær for rektor ved University of Tasmania. Henrietta Clark Donaldson døde den 20. november 1997.

Den 5. september 2001 giftede professor John Donaldson sig med Susan Elizabeth Donaldson (født Horwood), britisk forfatter.

Dronningen har to søstre og en bror: Jane Alison Stephens, født den 26. december 1965, Patricia Anne Bailey, født den 16. marts 1968, og John Stuart Donaldson, født den 9. juli 1970.

Bryllup
​Den 14. maj 2004 blev Mary Elizabeth Donaldson gift med daværende H.K.H. Kronprins Frederik til Danmark og blev ved brylluppet H.K.H. Kronprinsesse Mary Elizabeth. Vielsen fandt sted i Vor Frue Kirke, Københavns Domkirke, og bryllupsfesten blev holdt på Fredensborg Slot.

Læs mere om Kongeparrets bryllup.

Børn​
H.K.H. Kronprins Christian Valdemar Henri John, født den 15. oktober 2005, H.K.H. Prinsesse Isabella Henrietta Ingrid Margrethe, født den 21. april 2007, H.K.H. Prins Vincent Frederik Minik Alexander, født den 8. januar 2011, og H.K.H. Prinsesse Josephine Sophia Ivalo Mathilda, født den 8. januar 2011.

Bopæl
​​Kongeparret bor i Frederik VIII's Palæ på Amalienborg, København, og benytter Kancellihuset på Fredensborg Slot i Fredensborg.

Uddannelse
Dronningens skolegang begyndte på Clear Lake City Elementary School i Houston, Texas, 1974-1975. Tilbage i Hobart gik Dronningen på Sandy Bay Infants School 1975-1977. Fra 1978 til 1982 gik Hendes Majestæt på Waimea Heights Primary School. Dronningen gik på Taroona High School fra 1983 til 1986 og fortsatte herefter med studier på Hobart Matriculation College i de næste to år, hvor Hendes Majestæt også var meget aktiv med sport. I 1989 påbegyndte Dronningen studier på University of Tasmania og afsluttede i 1994 med en bachelorgrad i handel og jura (B Com. LLB).

​I perioden 1994-1996 kvalificerede Dronningen sig til et certifikat for reklamevirksomhed fra Advertising Federation of Australia (AFA) og efterfølgende til et certifikat for markedsføring fra Australian Direct Marketing Association.

Erhvervsbaggrund
Efter afsluttede universitetsstudier flyttede Dronningen til Melbourne for at arbejde hos det verdensomspændende reklamefirma DDB Needham og blev efterfølgende konsulent med kundeansvarlig ledelse.

​​Dronningens karriere fortsatte med en stilling som kundeansvarlig leder hos MOJO Partners, også i Melbourne.

I 1998 rejste Hendes Majestæt rundt i Amerika og i stor udstrækning i Europa, særligt i sin fars hjemland, Skotland, hvor Dronningen indgik en tre-måneders kontrakt med Rapp Collins Worldwide i Edinburgh om ansættelse som kundeansvarlig leder.

I begyndelsen af 1999 vendte Dronningen tilbage til Australien, hvor Hendes Majestæt blev ansat som kundeansvarlig direktør hos det internationale reklamebureau Young and Rubicam i Sydney.

Dronningen arbejdede senere i en kort periode hos et mindre australsk firma, Love. Senere blev Hendes Majestæt salgsleder og medlem af ledergruppen hos Belle Property i Sydney.

I første halvår af 2002, efter en beslutning om at ville flytte til Europa, arbejdede Dronningen i en kort periode i Paris, hvor Hendes Majestæt underviste i engelsk på den engelske erhvervssprogskole TRANSFER Etoile.

Senere i 2002 flyttede Dronningen til Danmark og blev ansat hos Microsoft Business Solutions som projektkonsulent for virksomhedsudvikling, kommunikation og marketing.

Militær karriere
Dronningen startede som menig i Hjemmeværnet i 2008. Hendes Majestæt blev efter uddannelse sergent i Hjemmeværnet i 2009, løjtnant i Hjemmeværnet i 2009, premierløjtnant i Hjemmeværnet i 2015, kaptajn i Hjemmeværnet i 2019 og major á la suite i Hjemmeværnet i 2023.

Dronningen har deltaget i en lang række aktiviteter og øvelser i hjemmeværnsregi ved Hær-, Marine- og Flyvehjemmeværnet.

Sprog
​​Dronningens modersmål er engelsk, og Hendes Majestæts andet sprog er dansk.